L'utilisation d'un pilon de broyage est essentielle pour rompre physiquement le dur exosquelette de la mouche et libérer les micro-organismes internes. Sans cette intervention mécanique, la solution saline stérile ne capturerait que les bactéries présentes à la surface de l'insecte, sans récupérer la population microbienne importante située à l'intérieur du corps.
En broyant mécaniquement la mouche entière, vous assurez l'exposition du microbiote intestinal interne. Ceci est essentiel pour générer un liquide d'échantillonnage qui représente la charge bactérienne totale plutôt que la seule contamination de surface.
La fonction de la lyse mécanique
Détruire l'exosquelette
Les mouches possèdent une couche externe résistante connue sous le nom d'exosquelette. Cette structure agit comme une barrière physique qui protège les tissus internes de l'environnement.
L'utilisation d'un pilon de broyage vous permet de détruire physiquement cette barrière. Cette étape est le préalable à l'accès à tout matériel biologique contenu dans l'insecte.
Accéder aux réservoirs internes
Une portion importante de la charge microbienne d'une mouche réside dans ses systèmes internes. Spécifiquement, le microbiote intestinal interne contient de fortes concentrations de bactéries.
Le simple lavage ou le prélèvement par écouvillonnage de surface ne peuvent pas atteindre ces populations. Le broyage assure que ces compartiments internes sont ouverts et que leur contenu est libéré.
Assurer la précision analytique
Créer un échantillon complet
Pour qu'un test microbien soit valide, le liquide d'échantillonnage doit contenir tous les composants microbiens.
Lorsque la mouche est broyée dans une solution saline stérile, le liquide devient une suspension de bactéries de surface et internes. Cela crée un mélange homogène qui reflète fidèlement le microbiome entier de l'insecte.
Valider les résultats de culture
L'objectif final est d'inoculer des milieux de culture pour un dénombrement bactérien total.
Si l'intestin interne n'est pas exposé, les colonies résultantes ne refléteront que les vecteurs externes. Le broyage garantit que la croissance ultérieure sur le milieu de culture fournit une évaluation complète du dénombrement total.
Les risques d'un traitement incomplet
Le danger d'un sous-comptage
Si le processus de broyage est omis ou mal effectué, l'exosquelette reste intact.
Cela conduit à un "faux négatif" significatif dans vos données. Vous ne détecterez pas le microbiote intestinal interne, rendant votre évaluation de la charge bactérienne totale scientifiquement inexacte.
Faire le bon choix pour votre objectif
Pour vous assurer que votre méthodologie correspond à vos objectifs de recherche, appliquez les principes suivants :
- Si votre objectif principal est un dénombrement bactérien total : Vous devez broyer la mouche soigneusement pour détruire l'exosquelette et libérer le microbiote intestinal dans la solution saline.
- Si votre objectif principal est uniquement la contamination de surface : Vous devriez éviter le broyage, car cela contaminerait votre échantillon avec des bactéries intestinales internes.
L'homogénéisation mécanique est le pont entre un simple lavage de surface et une analyse microbienne réelle et complète.
Tableau récapitulatif :
| Composant du processus | Rôle dans les tests microbiens | Impact sur la précision des données |
|---|---|---|
| Pilon de broyage | Détruit l'exosquelette et libère la flore intestinale | Empêche le sous-comptage des bactéries internes |
| Solution saline stérile | Agit comme un support pour la suspension | Assure un échantillon homogène pour l'inoculation |
| Lyse mécanique | Ouvre les compartiments biologiques internes | Capture le microbiome total par rapport à la surface uniquement |
| Élimination de l'exosquelette | Élimine la barrière physique aux réservoirs internes | Permet une évaluation complète du dénombrement total |
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Références
- Kortnee Van Nest, Phillip Shults. Assessing the feasibility, safety, and nutritional quality of using wild-caught pest flies in animal feed. DOI: 10.1093/jee/toad239
Cet article est également basé sur des informations techniques de Kintek Press Base de Connaissances .
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